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一種構建多位點突變重組表達質粒的高效方法
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項目成果/簡介:
本發明公開了一種構建多位點突變重組表達質粒的高效方法，包括如下步驟：將表達質粒pHAT2用雙酶切方法采用兩種限制性內切酶NcoI和XhoI酶切產生帶有粘性末端5’?CATG?3’和5’?AGCT?3’線性片段，回收線性化質粒片段備用；PCR引物設計；進行三輪PCR反應得到突變表達載體；進行連接反應；構建突變表達載體。本發明具有突變率高、簡單易行的特點。
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