轉基因骨髓間充質干細胞結合支架修復退變椎間盤技術

生物、醫藥及醫療機械

已成功構建Ad-GDF-5和Ad-GFP；已成功構建小腸粘膜下層和殼聚糖－聚己酸內酯支架；目前已完成動物椎間盤退變模型的制作，間充質干細胞的提取，分離，培養和鑒定；已制備轉基因MSCs，完成轉基因MSCs的細胞特性，其和支架之間的相互影響。

（1）、重組腺病毒Ad-GDF-5以及對照空載腺病毒Ad-GFP制備的檢測采用PCR、熒光顯微鏡、western-blot方法；（2）、采用相應物理化學工藝處理材料制備小腸粘膜下層和殼聚糖－聚己酸內酯支架，采用電子顯微鏡觀測（3）、間充質干細胞（MSCs）的采集，培養和鑒定，運用特定抗體采用流式細胞術鑒定；（4）、用Ad-GDF-5和Ad-GFP分別轉染MSCs得到轉基因MSCs，熒光顯微鏡、熒光計數器及western-blot檢測轉染情況；（5）、轉基因的MSCs復合支架的體外培養，電子顯微鏡、DNA含量檢測等方法研究細胞支架復合情況；（6）、構建動物退變椎間盤模型，大體及切片染色檢測退變情況；（7）、體內試驗部分主要通過大體觀察、組織切片、原位免疫熒光、western-blot等方法檢測。

待成果成熟后推廣。