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 高志良教授團(tuán)隊(duì)與雙聘教授鄺棟明教授團(tuán)隊(duì)合作，在“十三五”國(guó)家科技重大專項(xiàng)和國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目等基金的支持下，發(fā)現(xiàn)了PD-L1+肝癌免疫微環(huán)境存在高度的異質(zhì)性。研究證實(shí)巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞釋放的炎性介質(zhì)均參與了PD-L1+肝癌形成，但巨噬細(xì)胞同時(shí)賦予了PD-L1+肝癌可抵抗傳統(tǒng)化療、T細(xì)胞殺傷和免疫檢查點(diǎn)治療的特征。聯(lián)合免疫檢查點(diǎn)治療和巨噬細(xì)胞功能調(diào)控有望成為新型的肝癌治療策略。同時(shí)，上述主體研究結(jié)論同時(shí)在多種人類腫瘤中得到驗(yàn)證。

免疫檢查點(diǎn)抑制劑在“所有等級(jí)毒性”和“3-4級(jí)毒性”方面的安全性排序由高到低均為：阿特朱單抗、納武單抗、帕姆單抗、伊匹單抗、tremelimumab。具體而言，相較于傳統(tǒng)治療，免疫檢查點(diǎn)抑制劑所致毒性主要體現(xiàn)在皮膚、內(nèi)分泌系統(tǒng)、肝臟和肺。單藥免疫檢查點(diǎn)抑制劑（除tremelimumab外）相較于免疫檢查點(diǎn)抑制劑藥物聯(lián)用或免疫檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合傳統(tǒng)治療具有更高的安全性。       毒性譜方面：tremelimumab 的毒性譜最廣最嚴(yán)重，或可導(dǎo)致嚴(yán)重的皮膚、消化系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)不良事件；阿特朱單抗雖然在安全性排行榜上列第一位，但其具有最高的致甲低、惡心、嘔吐的風(fēng)險(xiǎn)；帕姆單抗主要導(dǎo)致關(guān)節(jié)痛、肺炎、肝臟毒性；伊匹單抗所致毒性主要體現(xiàn)在皮膚瘙癢、結(jié)腸炎、腎臟毒性納武單抗的毒性譜最窄最溫和，而致甲亢和甲低風(fēng)險(xiǎn)稍高。       綜合證據(jù)發(fā)現(xiàn)：納武單抗在安全性方面——尤其對(duì)于肺癌患者——是最佳的選擇。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)：同一免疫檢查點(diǎn)抑制劑藥物藥物的不同給藥劑量在其所致毒性方面一般沒(méi)有顯著差異，但伊匹單抗10 mg/kg/3 wk的風(fēng)險(xiǎn)顯著高于3 mg/kg/3 wk。

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項(xiàng)目背景：我國(guó)是食管癌高發(fā)國(guó)家之一。中晚期食管癌的 5 年生存率不足 20%，而早期食管癌的 5 年生存率可超過(guò) 95%。因 此，提高早期食管癌檢出率，是改善患者預(yù)后、節(jié)約國(guó)家醫(yī)療資 源的有效途徑。目前用于食道癌的檢測(cè)和篩查方法有影像學(xué)檢測(cè) 技術(shù)、組織活檢、腫瘤血清標(biāo)識(shí)物檢測(cè)等。這些技術(shù)分別由于設(shè) 備和技術(shù)成本太高，侵入性太強(qiáng)和血清腫瘤標(biāo)識(shí)物(如 AFP、CEA、 CA125 和 CA199 等)對(duì)食管癌檢測(cè)的靈敏度太低，而無(wú)法大范圍 推廣。近年的研究顯示表觀遺傳學(xué)在癌癥的發(fā)生、發(fā)展中起著重 要作用。DNA 甲基化異常通常發(fā)生在癌癥早期，并貫穿癌癥的發(fā) 生和發(fā)展過(guò)程，其甲基化狀態(tài)一旦形成需要受到外界環(huán)境較長(zhǎng)時(shí) 間的持續(xù)刺激才會(huì)發(fā)生改變，因此 DNA 甲基化指標(biāo)的檢測(cè)可以作 為癌癥診斷、早期篩查以及預(yù)后的重要生物指標(biāo)。本項(xiàng)目擬通過(guò) 篩選食管癌相關(guān)甲基化基因，建立基于 qPCR/數(shù)字 PCR 的食管癌 基因甲基化檢測(cè)方法，獲取檢測(cè)速度更快、靈敏度更高、特異性 和準(zhǔn)確性更強(qiáng)的檢測(cè)技術(shù)，提高食道癌早癌檢出率，改善治療效 果，降低死亡率。并對(duì)青島西海岸地區(qū) 45-74 歲癌癥高發(fā)人群進(jìn) 行惠民篩查，以提高民眾癌癥早篩早診意識(shí)，降低未來(lái)的發(fā)病率 和死亡率，減輕個(gè)人及家庭負(fù)擔(dān)，達(dá)到惠民的重要意義。同時(shí)通 過(guò)大樣本量的檢測(cè)，形成完善的食管癌篩查體系，建立食管癌防治新模式。 所需技術(shù)需求簡(jiǎn)要描述：1.對(duì)食管癌患者的腫瘤組織樣本進(jìn) 行 qPCR/數(shù)字 PCR 分析，篩選出食管癌特異性的甲基化基因，驗(yàn) 證其作為早篩標(biāo)志物的可行性。2.構(gòu)建針對(duì)食管癌篩查的判斷模 型，獲取具有更高靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性的檢測(cè)方法，實(shí)現(xiàn)食 管癌的早期篩查與診斷。3.對(duì)青島西海岸或周邊地區(qū) 45-74 歲符 合食管癌早篩的人群，進(jìn)行大規(guī)模的食管癌篩查，開(kāi)展食管癌重 大疾病篩查的惠民項(xiàng)目。  對(duì)技術(shù)提供方的要求:1.需要具備 qPCR/數(shù)字 PCR 平臺(tái)和高 性能計(jì)算機(jī)平臺(tái)等設(shè)備，以及掌握 qPCR/數(shù)字 PCR 檢測(cè)技術(shù)以及 生物信息分析技術(shù)的人員。2.可以提供食管癌患者及正常人群的 組織樣本 

團(tuán)隊(duì)對(duì)12例多灶肝癌患者的45個(gè)腫瘤樣本及對(duì)應(yīng)癌旁正常組織進(jìn)行了全基因組測(cè)序、全外顯子測(cè)序及RNA測(cè)序。研究發(fā)現(xiàn)同一患者的大癌灶和小癌灶的基因組特征存在極大的相似性，包括相同的HBV-DNA整合位點(diǎn)，相似的染色體結(jié)構(gòu)變異、突變特征及拷貝數(shù)變化情況，提示12例多灶肝癌患者的大癌灶和小癌灶屬于肝內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤。該團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步分析45個(gè)癌灶的免疫微環(huán)境，發(fā)現(xiàn)同一患者中，與大癌灶相比，小癌灶具有更多的免疫細(xì)胞浸潤(rùn)，免疫活性刺激因子以及預(yù)測(cè)PD-1抗體治療療效的干擾素相關(guān)特征在小癌灶中表達(dá)上調(diào)。免疫相關(guān)通路在小癌灶中富集，而增殖及血管生成相關(guān)通路在大癌灶中更富集。此外，大部分小癌灶呈現(xiàn)sia分型中的“免疫反應(yīng)亞型”。這些結(jié)果表明，同一肝癌患者的小癌灶比大癌灶具有更活躍的免疫狀態(tài)。     為進(jìn)一步探討不同大小的癌灶對(duì)PD-1抗體治療是否具有不同的治療響應(yīng)，該團(tuán)隊(duì)對(duì)8例接受PD-1抗體治療的多灶肝癌患者全部癌灶的免疫治療應(yīng)答情況進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果發(fā)現(xiàn)其中5例多灶肝癌患者的大癌灶和小癌灶對(duì)PD-1抗體治療存在混合反應(yīng)，均體現(xiàn)為小癌灶具有更好的免疫治療療效——PD-1抗體治療后，小癌灶平均縮小46.3%，而同一病例的大癌灶平均增加14.9%。

本研究利用人工合成的免疫抗原，經(jīng)動(dòng)物免疫后獲得特異性好的多克隆抗體，建立了 MC-LR 高靈敏間接競(jìng)爭(zhēng) ELISA 檢測(cè)方法，經(jīng)和國(guó)外進(jìn)口的同類產(chǎn)品比較，在很多關(guān)鍵指標(biāo)上已經(jīng)達(dá)到或超過(guò)進(jìn)口產(chǎn)品。該藻毒素快速檢測(cè)技術(shù)和檢測(cè)產(chǎn)品，靈敏度較高，特異性好，制備簡(jiǎn)單，成本低廉，適合規(guī)模化試劑盒的生產(chǎn)。 創(chuàng)新要點(diǎn) （1）性能指標(biāo)達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平。經(jīng)第三方專業(yè)權(quán)威機(jī)構(gòu)或部門(mén)的驗(yàn)證（附件 11），最低能檢測(cè)出 0.05ng/ml 的 MC-LR 含量，本項(xiàng)目產(chǎn)品技術(shù)含量高，操作簡(jiǎn)便快捷，結(jié)果靈敏準(zhǔn)確，檢測(cè)成本低廉

通過(guò)對(duì)NMDA患者及健康南方漢族人群進(jìn)行HLA基因分型，研究發(fā)現(xiàn)HLA_DRB1*16:02等位基因和抗NMDAR腦炎相關(guān)。另外，除了增加疾病易感性外，HLA_DRB1*16:02等位基因和該疾病針對(duì)治療反應(yīng)相關(guān)，表現(xiàn)為攜帶該等位基因患者對(duì)治療反應(yīng)較差。最后，利用生物信息技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)，NMDAR的NR1亞單位上的抗原表位能夠與HLA II類DRB1*16:02分子緊密結(jié)合，顯示它可能是導(dǎo)致疾病的T細(xì)胞抗原表位。

本發(fā)明涉及一種新的免疫毒素，其特征在于利用人源性毒素穿孔素（Perforin）的活性片斷作為毒素分子，通過(guò)基因工程技術(shù)將毒素分子與載體分子的基因重組在大腸桿菌中表達(dá)出的免疫毒素，其優(yōu)點(diǎn)是對(duì)人體不具有免疫原性，有嚴(yán)格靶向性，可直接激發(fā)細(xì)胞損傷過(guò)程，殺滅靶細(xì)胞，不需要內(nèi)化及細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程，可用于治療某些腫瘤和自身免疫性疾病。特別是適合于抑制器官移植時(shí)的免疫排斥

已有樣品/n微粒均相免疫檢測(cè)平臺(tái)是新一代免疫檢測(cè)技術(shù)，基于生物合成的納米載體和新的標(biāo)記技術(shù)，結(jié)合圖像識(shí)別和微通道分析技術(shù)，能實(shí)現(xiàn)對(duì)微量樣本（5-10μL 樣本/次），在 1-10 分鐘內(nèi)對(duì)抗原或抗體的檢測(cè)，靈敏度比傳統(tǒng)的免疫凝集檢測(cè)高 100-1000 倍。特別適合快速鑒定病原菌及對(duì)血清樣本中特定抗體的篩查等。目前已成功應(yīng)用于大腸桿菌 O157：H7 的鑒定及中東呼吸道綜合征冠狀病毒（MERS-CoV）的抗體檢測(cè)。 市場(chǎng)前景:可廣泛應(yīng)用于各類病原快速檢測(cè)，前景廣闊。

涉及一種膠體金半定量免疫診斷試紙條的制作和裝配方法。該試 紙條利用免疫層析原理，可迅速目檢出納米膠體金標(biāo)記物和樣品結(jié)合 后的顏色，并通過(guò)測(cè)試區(qū)與平行參比區(qū)的顏色對(duì)比的強(qiáng)弱來(lái)判定檢測(cè) 的半定量結(jié)果，具有反應(yīng)迅速，可迅速判定樣品中待測(cè)物的有無(wú)及其 含量高低的特性。